Объект, программа и методика исследований
Культивировали водоросли двумя методами: методом почвенных культур и методом агаровых культур.
При методе почвенных культур [5] в лабораторных условиях на электронных весах взвешивали по 30 г субстрата из каждого конверта. Далее, предварительно стерилизованные в термостате чашки Петри заполняли взвешенной почвой и подписывали: водоустойчивым маркером на верхней крышке каждой чашки помечалась дата засева почвой, а также номер образца. Почву умеренно полили дистиллированной водой и, для придания неровности поверхности, стерильной иглой сообщили шероховатый микрорельеф. В каждую чашку Петри, слегка прижимая к почве, уложили по пять стерильных покровных стекол. Культивировали водоросли при температуре 20±3 ºC, и освещении лампы дневного света мощностью 1700-2500 лк 10-14 часов ежедневно. Не допуская переувлажнения, почву периодически поливали дистиллированной водой по мере ее подсыхания.
При методе агаризованных чашек Петри [48] приготовленную среду (таблица 1) стерилизовали при температуре 120 ºC в течение 20 минут, потом охладили его до 50-60 ºC, после чего разлили в стерильные чашки Петри.
Таблица 1 - Состав основной среды Болда
|
Растворы макроэлементов | |||
|
исх. - 400 мл, г |
пер. - 100 мл, г | ||
|
1 |
NaNO3 |
10,0 (30,0 - 3N BBM) |
2,5 (7,5) |
|
2 |
KH2PO4 |
7 |
1,75 |
|
3 |
K2HPO4 |
3 |
0,75 |
|
4 |
MgSO4 · 7H2O |
3 |
0,75 |
|
5 |
CaCl2 · 2H2O |
1 |
0,25 |
|
6 |
NaCl |
1 |
0,25 |
|
Растворы микроэлементов | |||
|
исх. - 1000 мл, г |
пер. - 250 мл, г | ||
|
1 |
ЕДТА |
50 |
12,5 |
|
KOH |
31 |
7,75 | |
|
2 |
FeSO4 · 7H2O |
4,98 (999 мл H2O и 1 мл конц. H2 SO4) |
1,245 (249,75 мл H2O и 0,25 мл конц. H2 SO4) |
|
3 |
H3BO3 |
11,42 |
2,855 |
|
4 |
ZnSO4 · 7H2O |
8,82 |
2,205 |
|
MnCl2 · 4H2O |
1,44 |
0,36 | |
|
MoO3 (MoO3 · H2O) |
0,71 (0,798) |
0,1775 (0,1995) | |
|
CuSO4 · 5H2O |
1,57 |
0,3925 | |
|
Co(NO3)2 · 6H2O |
0,49 (999 мл H2O и 1 мл конц. H2 SO4) |
0,1225 (249,75 мл H2O и 0,25 мл конц. H2 SO4) | |
Нагретую среду держали при температуре 50-60 ºC, поместив на водяную баню. После застывания среды чашки перевернули и хранили в воздухонепроницаемом контейнере при температуре 4 ºC в холодильнике до засева. В каждую чашку на агар положили по 5 вариантов почвы каждого образца, тщательно обмотали стенки парафильмом для сохранения стерильности.
Культивирование проводили в климатостате КС-200 при постоянных условиях: температура 20±3 ºС, периодическое освещение с интенсивностью 2500-3000 лк с 14/10-часовым чередованием световой и темновой фаз.
Еще статьи по экологии
Организация заповедного дела в России
Развитие человеческого общества никогда не было
бесконфликтным, непротиворечивым процессом. На протяжении всей истории
существования разумной жизни на Земле неизменно возникали вопросы, отве ...
Оценка состояния атмосферного воздуха города Оренбурга
Атмосферный
воздух - это жизненно важный компонент окружающей природной среды,
представляющий собой естественную смесь газов атмосферы находящуюся за
пределами жилых, производственных и ины ...
Функционирование системы территориального экологического менеджмента на урбанизированной территории
Актуальность
темы исследования. В мире, обществе и деятельности человека есть процессы
управляемые и неуправляемые. Неуправляемые процессы происходят по естественным
законам природы и общес ...